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많은 액상 방법완충액 염. 많은 사람들이 액체 상 방법에서 완충 염의 적용을 이해하지 못하는 것으로 나타났습니다. 그래서 저는 제 견해를 공유하고 토론을 자극하고 싶습니다.
샘플 또는 샘플에서 연구되는 주요 불순물이 이온화 경향을 갖는 경우, 다른 특정 경우가 별도로 논의될 것이다. 강한 이온화 경향을 가진 성분 중 일부는 분자 상태에 있고 역상 크로마토그래피 정지 상과 더 잘 결합됩니다. 다른 것들은 이온 상태에 있고 이동상에 대해 더 강한 친화력을 가지고 있습니다. 분자 상태 및 이온 상태의 이온화 상태가 완충제 염을 사용하여 조절되지 않으면, 피크 테일링 및 분기를 갖는 것이 용이하다. 이 경우 물과 유기 시스템을 이동상으로 사용해서는 안되며 완충 염과 유기 시스템을 선택해야합니다.
사용할 때완충 전해질 염모바일 단계에서는 특정 버퍼링 용량이 있어야합니다. 샘플 주입량의 감소가 피크 형상을 향상시킬 수 있다면, 이는 버퍼 염 용액의 완충 용량이 불충분하다는 것을 나타낼 수 있다. 완충 염 용액의 완충 용량은 완충 염의 농도 및 완충 염 용액의 pH 값과 관련된다. 완충 염의 농도가 높을수록 완충 용량이 강해집니다. 완충 염 용액의 pH 값이 pKa에 가까울수록 완충 용량이 강해집니다. 일반적으로 완충 염 용액의 pH 값은 pKa ± 1 범위 내에 있어야합니다. 메인의 유지 시간을 보장하기 위해 성분은 pH 값의 약간의 변화로 인해 크게 벗어나지 않으며, 완충 염 용액의 pH 값은 샘플 pKa ± 범위를 벗어야합니다. 2.
각각의 버퍼 염은 대응하는 컷오프 파장을 가지며, 방법의 검출 파장은 버퍼 염 용액의 컷오프 파장보다 작지 않아야 한다. 검출 파장이 이동 위상의 컷오프 파장에 가까울수록, 베이스라인 잡음이 높을수록, 응답 값 에러가 클수록, 성분 응답 값 및 감도는 작아진다.
1. 완충액 염의 농도는 일반적으로 10-50 mmol/L입니다. 완충액 염의 농도는 시료의 특성 및 주입량에 따라 선택되어 요구되는 완충 용량을 충족시켜야 한다.
2. 구배 용리에서 유기 상의 최대 허용 비율은 완충액 염과 유기 상의 실험을 혼합함으로써 결정되어야 한다. 10:90, 20:80, 30:70 등과 같은 유기 상의 최대 허용 비율을 결정하기 위해 다른 완충 염-유기 상 비율을 취해야합니다. 완충제 염은 완충제 염의 침전이 기구를 손상시키는 것을 방지하기 위해 기기에서 높은 비율로 설정되어서는 안된다.
3. 차단 파장, pH 값 및 버퍼링 용량 등과 같은 여러 제약 조건에 따라 버퍼 염을 선택하십시오. 예를 들어, 검출 파장이 최종 흡수에 있는 경우, 인산염이 일반적으로 선택되어야 한다.
4. 일반적인 완충액 염 용액에는 0.1% 인산/트리플루오로아세트산/아세트산/포름산 용액 0.02-0 이 포함된다. 05mol/L 인산 이수소 칼륨 용액 (인산으로 pH 3.0 조정) 등
5. 알칼리성 화합물의 경우 칼륨 염이 바람직하며, 이는 테일링 효과를 더 잘 억제 할 수 있습니다.
